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%A 周艳, 张婷, 王志荣, 许雪梅 %T 人乳头瘤病毒16 和18 型的E6 和E7 蛋白多克隆抗体制备及鉴定 %0 Journal Article %D 2025 %J 神经药理学报 %R 10.3969/j.issn.2095-1396.2025.01.001 %P 1- %V 15 %N 1 %U {http://actanp.hebeinu.edu.cn/CN/abstract/article_966.shtml} %8 2025-02-26 %X
目的:预测人乳头瘤病毒(human papillomavirus, HPV)16 型和18 型的E6 及 E7 蛋白的B 细胞线性表 位,制备兔抗HPV16 和HPV18 的E6 和E7 的多克隆抗体。方法:利用生物信息学软件分析HPV16 和HPV18 的E6 和E7 蛋白的氨基酸序列,预测B 细胞线性表位,设计并人工合成HPV16 E6、HPV16 E7、HPV18 E6 及 HPV18 E7 多肽,将合成肽分别与血蓝蛋白(keyhole limpet hemocyanin,KLH)偶联,免疫新西兰大白兔,制备 HPV16 和HPV18 的E6 和E7 多克隆抗体。以原核系统表达的重组蛋白Flic-HPV16 E6 E7、Flic-HPV18 E6 E7 为检测抗原,采用间接ELISA 法和Western blot 法检测多克隆抗体的效价和特异性。结果:ELISA 法检测所制 备的HPV16 E6、HPV16 E7 和HPV18 E7 多克隆抗体的效价可达1:2.56×105,HPV18 E6 多克隆抗体效价可达 1:1.28×105。Western blot 结果显示,所制备的抗体均能与相应的重组蛋白Flic-HPV16 E6E7 和Flic-HPV18 E6 E7 特异性结合。结论:采用人工合成肽作为免疫原成功制备了高效价、特异性好的兔抗HPV16 和HPV18 的E6 和E7 蛋白多克隆抗体,为后续进行HPV 感染检测、疫苗研发等实验研究创造了条件。