目的：建立地龙中次黄嘌呤与肌苷含量的测定方法，测定五种产地地龙成分，为地龙成分的提取工艺 研究、质量分析探索新型高效的研究方法。方法：建立HPLC 高效液相色谱法测定分析方法。色谱柱Agilent extend C18 色谱柱，4.6 mm × 250 mm，粒径：5 μm。流动相为甲醇 -0.2% 磷酸，波长选择254 nm，进样量选择20 μL，柱温为30 ℃，使用梯度洗脱法，建立次黄嘌呤和肌苷的标准曲线，进行精密度试验，稳定性试验，重复性试 验，加样回收试验等方法学考察。结果：次黄嘌呤标准曲线：y = 78.819x + 245.92，R2 = 0.999 9, 在 10.08~161.28 μg·mL-1 范围内呈良好线性关系; 肌苷标准曲线：y = 56.566x + 68.333, R2 = 0.999 5, 在 20.08~321.28 μg·mL-1 范围内呈良好线性关系。实验精密度、稳定性、重复性良好，计算得到次黄嘌呤的平均回收率为 95.43%，RSD 值 为 1.52% (n=6)；肌苷的平均回收率为 99.86%，RSD 值为 2.36% (n=6)，广东、河南、海南、上海、广西五种产地地龙 的次黄嘌呤含量分别为：0.533 5、0.346 8、0.687 4、0.569 4、0.794 5 mg·g-1 ；肌苷含量为：1.562 5、 0.567 4、1.126 7、 0.843 6、1.284 9 mg·g-1。结论：建立的HPLC 高效液相色谱法，梯度洗脱效果较好，实验准确度良好，精密度良好， 稳定性良好，重复性高，是一种高效的分析测定方法。